产品货号:
MT0195
中文名称:
DNA上样缓冲液(6×)
英文名称:
6X DyeSafe Loading Buffer
产品规格:
500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是全新一代EB替代染料-DyeSafe,安全、灵敏度高、稳定性好,使用DyeSafe替代染料配制而成的Loading Buffer和DNA Marker具有安全、灵敏度高、稳定性好、使用方便等优点。
使用DyeSafe替代染料时,在制胶过程中无需加入EB、SYBR Green和GoldView等核酸染料,只需将DNA(PCR产物、质粒或基因组DNA)与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳。由于DyeSafe替代染料的激发波长与EB激发光波长相同,故无需更换实验设备。DyeSafe真正实现了安全、灵敏度高、稳定性好的保证,成为真正的EB替代染料,是广大实验室工作人员的最佳选择。
目前国内大多数实验室使用的最普遍的核酸染料包括EB (溴化乙啶)、SYBR Green和GoldView,而这几种染料在安全性、稳定性和灵敏性方面都存在着不可忽视的缺点。其中EB是目前使用最广泛的核酸染料,其灵敏度相对较高,但它是一种剧毒且具有高诱变性的化学物质,极大的危及实验人员的身体健康;而SYBR Green稳定性差,在微碱性的电泳缓冲液中极易降解;市面上的GoldView则灵敏度较差,会影响实验结果的真实性。
- 安全:经细胞学试验证明EB替代物DyeSafe不能穿透胞膜,具有极低的细胞毒性和诱变性。
- 高灵敏度:等于或稍高于EB,远远高于GoldView和SYBR Green。
- 使用方便:无需加入凝胶中,只需将DNA与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳,电泳后可直接进行观察。
- 简化制胶过程:1min即可制备琼脂糖凝胶。
- 由于该染料无需添加入凝胶中,使制备的凝胶可保存更长时间,从而节省凝胶的用量。
- 激发波长与EB激发光波长相同,无需更换实验室设备。
- 稳定性高于EB、SYBR Green、GoldView,可长期储存。
- 毒性与灵敏度比较:
SYBR Green/GoldView:低毒/低灵敏度
DyeSafeTM:极低毒性/高灵敏度
EB:剧毒/高灵敏度
染料种类 | DyeSafe | EB | GoldView |
细胞毒性 | 极低毒 | 剧毒 | 低毒 |
灵敏度 | 高灵敏度 | 高灵敏度 | 高灵敏度 |
微波炉熔胶 | 1min | 1min | 1min |
凝胶温度降至65℃ | 0min | 10min | 10min |
倒入制胶槽中制胶 | √ | √ | √ |
Total time | 1min | 11min | 11min |
图1.分别使用1X SYBR Green I和DyeSafe对细胞进行37℃孵育,并分别在5分钟和25分钟时段进行观察。结果表明SYBR Green I染料迅速进入细胞并将细胞内的核酸染成亮绿色,而DyeSafe则因为不能穿透细胞膜而不能进入细胞,证明DyeSafe是安全的。
以1%琼脂糖凝胶制备为例。
- 称取1g琼脂糖,加入至100mL 1×TAE(或1×TBE)缓冲液中,微波炉加热至凝胶全部熔化。
- 将熔化的凝胶,直接倒入制胶槽中,室温冷却约15min使凝胶凝固成型。
- 吸取5μL样品与1μL 6×DyeSafe Loading Buffer混合均匀后,直接点样于琼脂糖凝胶上样孔内。
注意:样品与6×DyeSafe Loading Buffer务必混合均匀,使DNA与染料充分结合,混合后室温放置1~5min后再点样效果优佳。 - 凝胶置于1×TAE(或1×TBE)电泳缓冲液中电泳20~40min,电泳时间根据DNA片段大小决定。
- 电泳完毕后放置于紫外灯下观察结果。
相关搜索:DNA上样缓冲液(6×),DNA上样缓冲液,DNA上样液,EB替代染料,无毒核酸染料,6X DyeSafe Loading Buffer